紫外分光光度計(jì)在有機(jī)化學(xué)研究中得到廣泛的應(yīng)用。通常用作物質(zhì)鑒定、純度檢查,有機(jī)分子結(jié)構(gòu)的研究。在定量方面,可測(cè)定結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的化合物和混合物中各組分的含量,也可以測(cè)定物質(zhì)的離解常數(shù),絡(luò)合物的穩(wěn)定常數(shù),物質(zhì)分子量鑒別和微量滴定中指示終點(diǎn)以及在液相色譜中作檢測(cè)器等。紫外分光光度計(jì)的選擇:
我們?cè)谶x擇各種儀器時(shí),都有一定的標(biāo)準(zhǔn),如測(cè)量精度、或者測(cè)量范圍。而在選擇紫外分光光度計(jì)時(shí),我們考慮的是光學(xué)構(gòu)造、光譜范圍、樣品類(lèi)型和分析工具。
光學(xué)構(gòu)造主要是指紫外分光光度計(jì)給出的光是單光束還是雙光束。單光束是通過(guò)單束光進(jìn)行測(cè)量,在測(cè)量過(guò)程中給定波長(zhǎng),然后通過(guò)被測(cè)物和對(duì)照物得到吸光結(jié)果。而雙光束是通過(guò)一個(gè)斬光輪將光束一分為二。
光源包括紅外線(xiàn)、紫外線(xiàn)和可見(jiàn)光。鎢燈和鹵素?zé)粢话阒桓采w可見(jiàn)光部分。而氙燈則可以覆蓋紫外光和可見(jiàn)光區(qū)域。
紫外分光光度計(jì)通常使用光電倍增管和光敏二極管來(lái)測(cè)量吸光值。
在大部分的樣品類(lèi)型中,紫外分光光度計(jì)可接受樣品孔、小玻璃管cuvette、吸漿管和微孔板。
大部分單機(jī)型的紫外分光光度計(jì)包含了驅(qū)動(dòng)儀器運(yùn)行和管理數(shù)據(jù)的軟件。高性能的儀器,通常與PC機(jī)一起聯(lián)用,需要從制造商提供額外的軟件。同時(shí)用戶(hù)也可以選擇升級(jí)軟件以滿(mǎn)足他們的需要。
紫外分光光度計(jì)的基本工作原理:
紫外分光光度計(jì)利用一定頻率的紫外--可見(jiàn)光照射被分析的有機(jī)物質(zhì),引起分子中價(jià)電子的躍遷,它將有選擇地被吸收。一組吸收隨波長(zhǎng)而變化的光譜,反映了試樣的特征。在紫外可見(jiàn)光的范圍內(nèi),對(duì)于一個(gè)特定的波長(zhǎng),吸收的程度正比于試樣中該成分的濃度,因此丈量光譜可以進(jìn)行定性分析,而且根據(jù)吸收與已知濃度的標(biāo)樣的比較,還能進(jìn)行定量分析。